Діагностика та профілактика вірусних хвороб бджіл

Відео: Хвороби бджіл і їх ознаки

В даний час відомо більше 20 вірусів медоносних бджіл. Викликані ними хвороби дуже різноманітні, починаючи від вірусу мішечкуватого розплоду, відкритого майже сто років тому, і закінчуючи нещодавно відкритими ізраїльським вірусом гострого паралічу і ірідовіруси, які, на думку деяких американських вчених, в останні роки викликають так званий колапс бджолиних сімей в США.

З`явилися невідомі раніше шляхи зараження бджіл вірусами за рахунок появи нових паразитів. Поширився більше 40 років тому кліщ варроа став активним переносником вірусів гострого паралічу, деформації крил і інших вірусів. Нозема, що паразитує в кишечнику бджоли, сприяє зараженню бджіл вірусом чорних маточників, ниткоподібним і ірідовіруси. Тепер вже експериментально доведено, що вірус мішечкуватого розплоду може передаватися бджолиної маткою через яйце, при цьому матка виглядає абсолютно здоровою.

Віруси широко поширені серед бджіл. На одній пасіці може бути відразу кілька вірусів, але частіше за все бджоляр про це не здогадується. Наприклад, при легкому перебігу мішечкуватого розплоду бджоляр зазвичай не помічає загибелі 5% личинок, так як бджоли оперативно їх видаляють. Однак це позначається на продуктивності сімей бджіл. Бджоляр починає лікування хвороби, коли загибель личинок від мішечкуватого розплоду стає масовою і бджоли не встигають видаляти їх з осередків або коли безкрилі дорослі бджоли, уражені вірусом деформації крил, у великому числі повзають по пасіці.

У довідниках по бджільництву наводяться клінічні ознаки деяких вірусних хвороб бджіл. Однак діагностика за клінічними ознаками може використовуватися тільки як попередня. Наприклад, після загибелі личинок бджіл від вірусу гострого паралічу або вірусу мішечкуватого розплоду в процес можуть включатися бактерії - утилізатори мертвих тканин, такі ж, як при європейському гнільце. При наявності цих бактерій і клінічних ознак, схожих з європейським гнильцом, діагноз може бути поставлений неправильно, відповідно таким буде і лікування. В даний час рекомендації з діагностики європейського гнилизна радикально перероблені. Висновки про встановлення європейського гнилизна, засновані на застарілих рекомендаціях, у багатьох випадках не відповідають дійсності.

Розроблено багато методів діагностики вірусних хвороб бджіл. Вони вимагають кваліфікованого персоналу і лабораторних умов, проте в даний час практично неможливо отримати кваліфіковану послугу по діагностиці та лікуванню хвороб бджіл. Бджолярі, як правило, самі ставлять діагноз і самі лікують бджіл. Процес лікування зазвичай не викликає ускладнень, діагноз на варроатоз або аскосфероз ставлять правильно, а ось діагностику, що вимагає лабораторних досліджень, бджоляр провести не в змозі.

Вихід може бути знайдений у створенні тест-систем, які не потребують кваліфікації і лабораторного оточення. У пасічних умовах можливе використання діагностичних тестів на основі стандартної технології іммунохроматографіческіх стрип-тестів для діагностики вірусних і бактеріальних хвороб. Час аналізу за допомогою такого тесту не більше 30 хв. Число основних маніпуляцій не більше двох. Стабільність вироби при кімнатній температурі більше року. Специфічність більше 95%. Тест являє собою невеликий пластмасовий чіп з отвором для внесення матеріалу і шкалою з пористої мембрани. Такі тести випускає англійська фірма Vita для діагностики американського і європейського гнильців (рис. 1).

В даний час фірма «Діафарм» за участю ВНДІ експериментальної ветеринарії приступає до розробки таких тест-систем. Передбачається, що з їх допомогою можна буде проводити диференційну діагностику хвороб бджолиного розплоду (мішечкуватого розплоду, гострого паралічу, американського і європейського гнильців). Попередні розрахунки показують, що собівартість такої тест-системи буде не більше 60 руб.

При постановці діагнозу хвору личинку або лялечку витягують і поміщають в флакон з буфером, що містить детергенти і металеві кульки (входять в набір), струшують, при цьому відбувається подрібнення і екстрагування тканин личинки або лялечки. Потім додається піпеткою отриманий екстракт вносять через отвір в чіпі на подушку для зразка (рис. 2).

Екстракт рухається у напрямку до абсорбуючій подушці. При проходженні екстракту через подушку з кон`югатом з неї вимивається міститься в ній кон`югат відповідних антитіл з колоїдним золотом. Під час подальшого руху рідини відбувається утворення комплексів кон`югату антитіл з відповідними антигенами (якщо вони є в екстракті).

Утворені комплекси зв`язуються з антитілами, іммобілізованими на мембрані, на лінії тесту. В результаті з`являється смужка коричневого кольору. Контролем служить контрольна лінія, розташована далі, на якій иммобилизован шуканий антиген. Непов`язаними кон`югат на контрольній ділянці також повинен утворити смужку коричневого кольору. Позитивним вважається результат, коли утворюються дві смужки (на лінії тесту і на контрольній ділянці). При негативному результаті з`являється тільки одна контрольна смужка. Повна відсутність смуг свідчить про неправильно проведених маніпуляціях і необхідності повторного дослідження.

Вірусологічні дослідження особливо необхідно проводити в господарствах, які займаються продажем сімей бджіл і маток. При виявленні сімей-вірусоносіїв не слід використовувати їх при племінному розведенні. Заходи по боротьбі з вірусними хворобами бджіл повинні бути спрямовані на знищення паразитів, що поширюють ці хвороби, і на профілактику і лікування противірусним препаратом ендоглюкин.

Ендоглюкин - вдосконалена форма препарату на основі ендонуклеази, який в даний час проводиться фірмою «Діафарм». Препарати на основі ферментів ендонуклеази і рибонуклеази вже багато років використовуються для профілактики і лікування вірусних хвороб бджіл. При хронічному паралічі бджіл рибонуклеазу відчували В.І.Полтев, П.Л.Талпалацкій, Р.І.Салганік (1972), ендонуклеази і ендоглюкин при філаментовіроз - Ю.М.Батуев (1992).

Відео: Хвороби і лікування бджіл

Відомо, що у багатьох тварин і людини одним з факторів противірусного захисту є інтерферон. Його дія заснована на активації власних ендонуклеаз, за допомогою яких організм захищається від вірусів. Введення нуклеаз ззовні дозволяє швидше включити цей противірусний механізм.

Нуклеази - ферменти, які каталізують розщеплення фосфорно-діефірних зв`язків між нуклеотидами (основними «цеглинками») в молекулах нуклеїнових кислот. Розщеплення нуклеїнових кислот нуклеазами на фрагменти руйнує цілісність інформації, яку несуть полінуклеотіди, після чого вони вже не кодують синтез нових молекул вірусних нуклеїнових кислот і вірусних білків. Отже, нуклеази можуть таким чином переривати розмноження вірусів.

Вірусні нуклеїнові кислоти в складі віріонів одягнені білковими оболонками (чохлами), які захищають їх від дії пошкоджуючих зовнішніх факторів, і в тому числі, від нуклеаз. Цілі вірусні частки не чутливі до дії нуклеаз.

Коли вірус проникає в клітину, він скидає захисний білковий чохол, і вірусна нуклеїнова кислота може стати на цей період доступною шкідлива дія нуклеази. Введені в цей період ззовні нуклеази гидролизуют вірусні нуклеїнові кислоти. Розщеплення вірусних нуклеїнових кислот перешкоджає розмноженню вірусів.

Якщо введені ззовні нуклеази, проникнувши в заражену клітину, зруйнують молекули вірусних нуклеїнових кислот, то чи не можуть вони при цьому розщепити і власні клітинні нуклеїнові кислоти? Як показує практика, цього не відбувається.

Клітинні нуклеїнові кислоти не пошкоджуються потрапляють ззовні нуклеазами, якщо ці ферменти проникають у клітину шляхом піноцитозу, захоплення їх клітинними мембранами і укладення в піноцитозні вакуоль. В цьому випадку нуклеази будуть ізольовані всередині клітини. Цей шлях є основним або навіть єдиним способом потрапляння великих молекул в клітку з міжклітинної середовища.

Оскільки вірус потрапляє в клітку також шляхом активного захоплення (через рецептори), то при одночасному перебуванні вірусу і нуклеази в міжклітинному просторі вони можуть бути разом захоплені кліткою. В цьому випадку всередині піноцитозних вакуолей відбуватиметься їх взаємодія: атака нуклеазами вірусної нуклеїнової кислоти, що звільняється від білкового чохла. Нуклеаза буде розщеплювати вірусні нуклеїнові кислоти і гальмувати розмноження вірусів, не пошкоджуючи клітинні нуклеїнові кислоти і не порушуючи життя клітини.

Крім противірусної дії було відзначено стимулюючу дію ендоглюкин на пасіках, де не було явних ознак вірусних хвороб. Пояснити це явище можна тим, що на багатьох пасіках віруси циркулюють в прихованій (латентній) формі, але тим не менше стримують розвиток сімей бджіл у весняний період, а влітку знижують їх продуктивність. Пригнічуючи розмноження латентних вірусів, ендоглюкин сприяє більш швидкому розвитку сімей бджіл. Зовні це виглядає як стимулюючий ефект.

Відео: 6 DVD - Хвороби бджіл. Частина 1 (1 година 33 хвилини)

Ю.С.АЛІКІН, А.З.АФІНОГЕНОВ, Ю.М.БАТУЕВ, О.Ф.ГРОБОВ, В.П.КЛІМЕНКО,
Л.П.СЕНЖЕНКО, Л.В.КЕЛІН, А.В.ТРОНІН

НДКТІ БАВ, ГНЦ ВБ "Вектор", ТОВ «Діафарм», м Бердськ,
ДНУ «ВНДІ експериментальної ветеринарії», Москва

анотація:
Дано опис іммунохроматографіческіх тест-систем, що дозволяють проводити діагностику вірусних та бактеріальних хвороб бджіл в пасічних умовах, а також механізму противірусної дії ендоглюкин.

Ключові слова:
вірусні хвороби бджіл, імунохроматографічним тест, ендоглюкин.

ЛІТЕРАТУРА:
1. Батуев Ю.М. Ендонуклеаза і ендоглюкин - порівнюючи ефективність // Бджільництво. - 1992. -№7-8.
2. Полтев В.І., Талпалацкій П.Л., Салганик Р.І. Профілактика вірусного паралічу бджіл за допомогою рибонуклеази // 23-й Міжнародний конгрес з бджільництва. - Бухарест: Апімондія, 1972.

Поділися в соц мережах:

Увага, тільки СЬОГОДНІ!

Схожі